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國立中山大學 海洋生物研究所 陳宏遠所指導 鄭宇君的 單一或複合脂肪酸對海鱺前脂肪細胞分化及脂質累積之影響 （2012），提出紫蘇油omega 3關鍵因素是什麼，來自於脂質累積、分化、前脂肪細胞、海鱺、脂肪酸。
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單一或複合脂肪酸對海鱺前脂肪細胞分化及脂質累積之影響
為了解決紫蘇油omega 3 的問題，作者鄭宇君 這樣論述：
本研究建立海鱺前脂肪細胞培養系統，並將此系統應用於探討主要飼料脂質或脂肪酸對海鱺脂肪細胞增殖和分化程度、脂肪蓄積量及脂肪分化相關基因表現的影響，期能應用本系統結果，透過飼料脂肪或脂肪酸配方，調控海鱺魚體脂肪含量及分布。海鱺為少數可以餵飼高脂 (>17%) 飼料之溫水性海水魚種，且市場歡迎其肌肉具高油脂含量，能夠瞭解飼糧因子對脂肪細胞增殖及脂肪細胞油脂蓄積的調控，對海鱺養殖產出符合市場需求高質產品將有很大益處。研究分成四實驗， 包括 (實驗一)前脂肪細胞培養系統建立、(實驗二) 飼料脂肪酸在飼育實驗 (in vivo)與細胞實驗 (in vitro) 基因表現和脂質累積的相對應結果、(實驗三)
單一脂肪酸與(實驗四)複合脂肪酸對前脂肪細胞分化基因 CCAAT/enhancer binding protein- β (C/EBPβ)、peroxisome proliferator-activated receptors (PPARs)、fatty acid binding protein1 (FABP1)、fatty acid transport protein 2 (FATP2)、和fatty acid synthase (FAS) 及細胞脂質累積的影響。實驗一結果顯示海鱺前脂肪細胞最適培養條件為10% 胎牛血清的L-15培養液在28 °C恆溫培養，18天可增生至90% 滿盤 (c
onfluence)。經insulin-transferrin-selenium誘導初期分化後，於培養液添加10%脂質混合物 (lipid mixture)維持細胞分化，分化20天為成熟脂肪細胞，進行Oil Red O染色測定脂質累積量與即時定量PCR (real-time PCR)分析發現，成脂基因(adipogenic genes) FABP1、FATP2和FAS表現量會隨著分化時間而增加，於成熟脂肪細胞達到最高值。實驗二比較飼育實驗與細胞實驗在評估脂肪生成之研究之一致姓，使用相同脂肪酸組成處理時，含n-6脂肪酸為主的紅花油、橄欖油和棕櫚油飼料脂肪酸組，不論是飼育實驗和細胞實驗均比含n-3
脂肪酸為主的魚油和紫蘇油組更能增加脂質累積的效果，且in vitro與in vivo實驗PPARs和FABP基因表現量均呈現正相關，顯示海鱺前脂肪細胞實驗結果與海鱺飼育實驗脂肪分析結果相似度高。實驗三探討單一脂肪酸棕櫚酸 (palmitic acid，PA 16:0)、硬脂酸(stearic acid，SA 18:1 n-9)、油酸 (oleic acid，OA 18:1 -9)、亞麻油酸(linoleic acid，LA 18:2 n-6)、次亞麻油酸(α-linolenic acid，LNA 18:3 n-3)、Eicosapentaenoic acid (EPA 20:5 n-3)或Do
cosahexaenoic acid (DHA 22:6 n-3)七種脂肪酸對海鱺前脂肪細胞分化轉錄因子、成脂基因與脂質累積各有不同的影響。轉錄因子C/EBPβ和PPARs在分化初期即表現，且C/EBPβ和PPARγ基因表現時間比PPARα和PPARβ略早，成脂基因FABP1、FATP2和FAS則在分化中末期才開始表現。EPA、DHA、OA和LA使C/EBPβ和PPARs顯著表現，OA和EPA顯著增加FABP1、FATP2和FAS基因表現量。OA顯著增加脂肪細胞尺寸與脂肪細胞累積脂質量，而DHA抑制脂肪細胞肥大，且LNA和DHA明顯不利於油脂累積。棕櫚油、芥花籽油、大豆油、亞麻仁油、鯷魚油和鱈
魚肝油是魚類飼料主要使用的油脂，實驗四將這些油脂的主要脂肪酸以複合方式加入培養液，瞭解多個脂肪酸的協同或拮抗效應。複合油脂中含有OA、LA、EPA和DHA時，均會增加轉錄因子 (C/EBPβ和PPARγ) 基因表現，此四個脂肪酸彼此有協同作用但只有OA與濃度有關；一旦含有PA、SA或LNA，會產生拮抗作用而降低轉錄因子基因表現，其中LNA僅只要存在少量即會產生抑制效果。PA、OA和LA存在顯著提升FAS基因表現和三酸甘油酯 (TG)累積，且三個脂肪酸之間有協同作用；LNA、EPA和DHA均會降低FAS表現和TG含量。LNA、EPA和DHA存在會使脂肪細胞產生較高的活性氧物種，增加細胞氧化壓力。
本研究結果綜合顯示，富含LA與OA的油脂有助於增加海鱺脂肪細胞油脂蓄積，而含LNA的油脂不利於脂質累積，應用海鱺前脂肪細胞培養系統來推測營養素對海鱺脂肪生成的影響似無窒礙之處。