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蛹蟲草菌株之生理生化特性與親緣分析

為了解決mg g換算的問題，作者張郁涵 這樣論述：

野生冬蟲夏草(Cordyceps sinensis)不易取得，價格昂貴且食用上有潛在的衛生安全問題，故近年來各界積極發展人工培育蛹蟲草(Cordyceps militaris)。許多研究結果顯示，蛹蟲草所含機能性成分與冬蟲夏草十分相似，可作為替代之一，其藥理上具有抗氧化、抑制腫瘤、調節血糖、調節免疫系統、調節呼吸系統與提升生育能力等功效，具開發為健康食品及植物新藥之潛力。本研究針對不同來源之蛹蟲草比較菌絲生長速率、菌絲球產量、子實體產量及機能性成分含量，並利用ITS序列及脈衝式電泳進行親緣性研究。研究結果顯示，菌株在平板培養之生長速率於培養144小時具有明顯差異，以BCRC 32219最快，

菌株 A最慢；液態培養菌絲球產量在192小時具有明顯差異，以菌株 E最高，菌株 A最低；但培養240小時後，菌株 A反而有最高菌絲球產量，菌株 B 、D、E產量則下降。BCRC 32219、菌株 B及菌株 E經固態培養後均未形成子實體；經45天光培養後進行採收，其子實體產量(濕重)以菌株 A最高(11.53 g)，菌株 C次之(7.11 g)，菌株D最低(5.15 g)，上述子實體經冷凍乾燥後，乾重分別為1.77 g、1.47 g及1.30 g，換算子實體水分含量約佔76~85%；蟲草素(cordycepin)含量分析結果以菌株 A最高(101.07 mg/g)、菌株 C次之(19.20 mg

/g)、菌株 D最低(17.83 mg/g)；多醣體含量分析結果以菌株 C最高(3.02mg/g)、菌株 A次之(2.73 mg/g)、菌株 D (1.51 mg/g) 最低。各菌株ITS序列經定序後，進行GeneBank序列資料庫比對，除了菌株 B定序結果為Paecilomyces lilacinus，其餘菌株皆為C. militaris，內轉錄區(ITS)序列親緣分析結果可分為(bootstrap > 90)：第Ⅰ群包括菌株BCRC32219與菌株 E；第Ⅱ群包括菌株菌株 C與菌株 D；第Ⅲ群包括菌株A；第Ⅳ群包括菌株菌株 B，各群分布結果與子實體產量具有相關性。脈衝式電泳結果應可藉由提高

樣品菌絲濃度與增加樣品酵素破壁處理時間(>2小時)以提升細胞破壁率進而提高染色體DNA條帶之亮度。蛹蟲草標準菌株BCRC 32219之染色體DNA於825至1600 kb間有三條明顯條帶，分子量大小分別約900、1500及1600 kb，然而strain A由於原始DNA濃度偏低，僅出現淡條帶無法有效判別，有待進一步探討。