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植物菌質體分泌蛋白SAP11影響農桿菌轉殖效率之探討

為了解決toki蘋果的問題，作者蔡孟樺 這樣論述：

植物菌質體 (Phytoplasma)是一種細菌性病原菌，由於缺乏了生存相關的生合成與代謝之基因組及細胞壁，僅能寄生於植物的篩管細胞中，至今仍無法人工繁殖。菌質體染病的植株會有莖葉叢生、葉片畸形及變小、花器葉化及綠化、葉片黃化、髮根、不孕花及果實畸形等病徵。目前已知被解序的翠菊黃萎病菌質體 (AYWB)之基因組可編碼56種分泌性蛋白 (SAPs)。從SAP11AYWB擬南芥轉植株發現葉片皺縮及叢枝的外表型；並在本實驗室研究，已知蘋果叢枝病菌質體與花生簇葉病菌質體之分泌蛋白 SAP11CaPM及 SAP11PnWB，其擬南芥轉殖株也有叢枝外表型。在建立SAP11菸草轉殖株的過程中，發現相較於只

有載體的控制組轉殖株之轉殖成功率較高，因此推測SAP11會影響轉殖之效率。首先透過針筒注射接種法配合無菌組織培養建立出三種35S::SAP11AYWB、35S::SAP11CaPM以及35S::SAP11PnWB菸草轉殖株，發現三種SAP11轉殖菸草葉培植體會形成較多處的癒傷組織且分化出較茂密的不定芽，說明三種SAP11皆會促進轉殖效率。接下來從根瘤性狀實驗中得知三種SAP11參與在農桿菌轉殖效率的過程中提升轉殖效率。最後使用AGROBEST實驗偵測GUS報導基因之表現活性，顯示三種SAP11會使GUS基因的表現活性上升，因此推測SAP11會影響其他基因之轉殖效率。